Charakterisierung des Zellcyclusproteins CDC 48_p und funktionell assoziierter Proteine aus Saccharomyces cerevisiae

Projektleitung und Mitarbeiter

Mittelgeber DFG allgemein

Projektbeginn : 08.1991

Projektende : 08.1993

Tel./ Fax.:

Projektbeschreibung

Beim Ausfall des Zellcyclusgens CDC48 von Saccharomyces cerevisiae kommt es zu Wachstumsstillstand mit grosser Knospe und Ausbildung einer abnormen Spindel. Die zentrale Region des Proteins ist zum Hefe-Sekretionsprotein Sec 18p und seinem Saeugerhomologen weiterer Proteinkomponenten am jeweils folgenden Golgi-Kompartiment. Auch bei CDC48p wurde eine Vesikelassoziation festgestellt, was auf eine analoge molekulare Funktion, eventuell am Spindelkoerper, hinweist. Die molekulare Struktur des CDC48_p und seine intrazellulaere Lokalisation sollen aufgeklaert werden. Dazu soll das Protein durch ein synthetisches Epitop markiert werden. Ein in vitro-Test der CDC48_p-Bindung soll etabliert und zur Erfassung und Isolierung der zur Ausbildung des Komplexes notwendigen Komponenten benutzt werden. Weitere wechselwirkende Gene sollen als extragene Suppressoren von cdc48-Defekten charakterisiert und anhand ihrer Assoziation an CDC48p isoliert werden. Das zu 70% mit CDC48p identische Saeugerhomologe VCP soll auf seine Funktion und intrazellulaere Lokalisation in der Hefe getestet werden. Ziel ist die Aufklaerung der Rolle der Centrosomassoziierten Vesikel bei der Ausbildung und Funktion der mitotischen Spindel.

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